一种龟苓膏固体饮料及其制备方法pdf

  本发明涉及一种龟苓膏固体饮料及其制备方法。所述的龟苓膏固体饮料，由如下重量份的原料制备而成：全龟2‑40份、茯苓4‑30份、甘草5‑50份、栀子4‑10份、槐花4‑15份、罗汉果3‑25份、金银花2‑30份、薄荷3‑30份、凉粉草5‑40份、麦芽糊精1‑60份、白砂糖1‑60份。本发明还提供了一种龟苓膏固体饮料制备方法，该方法结合安全高效的生物酶解法、制剂工艺学对现有的龟苓膏生产的基本工艺及食品类型进行改进，制备出的龟苓膏固体饮料利用率高、稳定性高、适用人群广、功能性优于普通龟苓膏的龟苓膏固体饮料，并

  (19)中华人民共和国国家知识产权局 (12)发明专利申请 (10)申请公布号 CN 113796481 A (43)申请公布日 2021.12.17 (21)申请号 8.X A23L 2/84 (2006.01) A23L 33/00 (2016.01) (22)申请日 2021.08.04 (66)本国优先权数据 3.1 2020.08.05 CN (71)申请人 广东省中药研究所 地址 510665 广东省广州市天河区高唐路 229号4栋301房 (72)发明人 钟颖儿梁文恒钟楚婷魏苑君 王小兰马嘉镁李关英谢惠君 高华宏 (74)专利代理机构 长沙正奇专利事务所有限责 任公司 43113 代理人 周晟 (51)Int.Cl. A23L 2/39 (2006.01) 权利要求书1页 说明书7页 附图4页 (54)发明名称 一种龟苓膏固体饮料及其制备方法 (57)摘要 本发明涉及一种龟苓膏固体饮料及其制备 方法。所述的龟苓膏固体饮料，由如下重量份的 原料制备而成：全龟2‑40份、茯苓4‑30份、甘草5‑ 50份、栀子4‑10份、槐花4‑15份、罗汉果3‑25份、 金银花2‑30份、薄荷3‑30份、凉粉草5‑40份、麦芽 糊精1‑60份、白砂糖1‑60份。本发明还提供了一 种龟苓膏固体饮料制备方法，该方法结合安全高 效的生物酶解法、制剂工艺学对现有的龟苓膏生 产工艺及食品类型进行改进，制备出的龟苓膏固 体饮料利用率高、稳定性好、适用人群广、功能性 优于普通龟苓膏的龟苓膏固体饮料，并且成本 低，携带、运输、贮存方便，有效解决上述市面龟 A 苓膏所存在的问题。 1 8 4 6 9 7 3 1 1 N C CN 113796481 A 权利要求书 1/1页 1.一种龟苓膏固体饮料，其特征在于由如下重量份的原料制备而成： 全龟2‑40份、茯苓4‑30份、甘草5‑50份、栀子4‑10份、槐花4‑15份、罗汉果3‑25份、金银 花2‑30份、薄荷3‑30份、凉粉草5‑40份。 2.如权利要求1所述的龟苓膏固体饮料，其特征在于由如下重量份的原料制备而成： 全龟10‑20份、茯苓10‑15份、甘草15‑30份、栀子5‑8份、槐花6‑12份、罗汉果8‑15份、金 银花10‑15份、薄荷10‑15份、凉粉草10‑20份。 3.如权利要求1所述的龟苓膏固体饮料，其特征在于，其中还含有如下重量份的辅料： 麦芽糊精1‑60份、白砂糖1‑60份。 4.如权利要求1或2所述的龟苓膏固体饮料，其特征在于制备包括以下步骤： （1）取全龟，加入用龟重量的8‑12倍水提取两次，每次1‑3小时，过滤，将两次的滤液合 并得全龟水提液，将提取后的全龟龟渣收集备用； （2）取提取后的龟渣称重，然后粉碎制浆，其间不断加入水调节料液比位1:0.5‑20，制 得龟浆； 用柠檬酸或食用碱溶液调节龟浆pH至3.0‑9.0，加热至35‑80℃，按照0.1‑10万U/g龟渣 的量加入蛋白酶，恒温酶解3‑8h，然后加热使蛋白酶灭活，过滤，得龟酶解液； （3）取茯苓、甘草、栀子、槐花、罗汉果、金银花、薄荷、凉粉草，加入这些药材总重量8‑12 倍的水提取两次，每次0.5‑2小时，过滤，将两次的滤液合并混合得中药药液； （4）将全龟水提液、龟酶解液和中药药液三者混合，充分搅拌混匀后，过滤，浓缩，加入 麦芽糊精、白砂糖，用65%‑89%乙醇混合制粒，干燥，过筛，即得。 5.如权利要求4所述的龟苓膏固体饮料，其特征在于：所述的全龟为活龟洗净宰杀后， 去掉内脏后的部分。 6.如权利要求4所述的龟苓膏固体饮料，其特征在于：所述的步骤4中，制粒后的干燥过 程为：置于50‑70℃下鼓风干燥箱干燥5‑8h。 7.如权利要求4所述的龟苓膏固体饮料，其特征在于：所述的步骤4中，过的筛的目数为 20‑30目。 8.如权利要求4所述的龟苓膏固体饮料，其特征在于：所述的蛋白酶为木瓜蛋白酶、胰 蛋白酶、中性蛋白酶、碱性蛋白酶、风味蛋白酶中的一种或多种。 2 2 CN 113796481 A 说明书 1/7页 一种龟苓膏固体饮料及其制备方法 技术领域 [0001] 本发明涉及食品技术领域，具体涉及一种龟苓膏固体饮料及其制备方法。 背景技术 [0002] 湿热体质与多种重大疾病密切相关。据统计数据显示，中国一般人群中湿热体质 占比高达  13.09%。龟苓膏是历史悠久的传统药膳，最初为清宫中专供皇帝食用的名贵药 物，现代以广西梧州龟苓膏最为闻名。据《苍梧郡志》记载，早在明末清初的时候，苍梧郡（即 现梧州市）民间就出现了龟苓膏的专门店铺。龟苓膏作为传统药膳，具有滋阴润燥、清热解 毒、利湿等功效，尤适于阴虚湿热体质人群。 [0003] 据调查，市面上龟苓膏产品对龟原料的处理方法为水煎煮提取法，作为药渣弃去 的龟肉渣尚存多达 70‑90%的营养物质，同时龟甲经过煎煮，其提取率仅 7.0%，造成贵重药 材龟没有充分利用，产品功效受到较大影响。此外，龟苓膏作为特殊的膏状食品，其水分含 量高，稳定性差，不利于其运输、贮存。另外，抗氧剂、防腐剂等化学添加剂使用较多，这些均 降低了产品安全性，故本发明现从生产的基本工艺、产品剂型两方面对龟苓膏产品进行改进。 [0004] 《黄帝内经》:肾主骨，生髓，其华在发，开窍于耳及二阴。《医宗必读》说:肾为先天 之本”。肾主藏精，肾中精气推动人体的生长发育，促进生殖机能的成熟以及调节人体的生 理功能。而人体所有的生长发育，包括骨骼的生长发育，都依赖于肾气的推动和肾精的濡 养。肾精充沛时，骨髓得到濡养，骨骼就会强壮有力，若人体出现肾阴虚状态，则不利于骨骼 生长，导致骨质疏松症，故用斑马鱼骨质疏松模型，从防治骨质疏松的效果方面，反映其滋 阴效果。 [0005] 凡是具有清解火热毒邪，治疗热毒或火毒证的药物，皆称为清热解毒药，其主要应 用于热毒火毒蕴结肌肤所致的疮痈肿毒、丹毒、瘟毒发斑、炸腮、毒蛇咬伤，癌肿、水火烫伤 以及其他急性热性病，咽喉肿痛，热毒血痢等病症。近年来，清热解毒药被广泛应用于临床 上的病毒感染导致的炎症，如腮腺炎，病毒性肺炎，乙肝肺炎等等。故结合现代药理，采用斑 马鱼炎症模型，考察产品抗炎功效，反映其清热解毒效果。 发明内容 [0006] 本发明的目的是提供一种龟苓膏固体饮料及其制备方法，该方法结合安全高效的 生物酶解法、制剂工艺学对现有的龟苓膏生产工艺及食品类型进行改进，制备出的龟苓膏 固体饮料利用率高、稳定性高、适用人群广、功能性优于普通龟苓膏的龟苓膏固体饮料，并 且成本低，携带、运输、贮存方便，有效解决上述市面龟苓膏所存在的问题， 为实现上述目的，本发明的技术方案如下： 所述的龟苓膏固体饮料，由如下重量份的原料制备而成： 全龟2‑40份、茯苓4‑30份、甘草5‑50份、栀子4‑10份、槐花4‑15份、罗汉果3‑25份、 金银花2‑30份、薄荷3‑30份、凉粉草5‑40份。 [0007] 优选的，所述的龟苓膏固体饮料，由如下重量份的原料制备而成： 3 3 CN 113796481 A 说明书 2/7页 全龟10‑20份、茯苓10‑15份、甘草15‑30份、栀子5‑8份、槐花6‑12份、罗汉果8‑15 份、金银花10‑15份、薄荷10‑15份、凉粉草10‑20份。 [0008] 所述的龟苓膏固体饮料，其中还含有如下重量份的辅料：麦芽糊精1‑60份、白砂糖 1‑60份。 [0009] 所述的全龟为活龟洗净宰杀后，去掉内脏后的部分。 [0010] 所述的龟苓膏固体饮料，制备包括以下步骤： （1）取全龟，加入用龟重量的8‑12倍水提取两次，每次1‑3小时，过滤，将两次的滤 液合并得全龟水提液，将提取后的全龟龟渣收集备用； （2）取提取后的龟渣称重，然后粉碎制浆，其间不断加入水调节料液比位1:0.5‑ 20，制得龟浆； 用柠檬酸或食用碱溶液调节龟浆pH至3.0‑9.0，加热至30‑80℃，按照0.1‑10万U/g 龟渣的量加入蛋白酶，恒温酶解3‑8h，100℃下加热灭酶10min后过滤，得龟酶解液； （3）取茯苓、甘草、栀子、槐花、罗汉果、金银花、薄荷、凉粉草，加入这些药材总重量 8‑12倍的水提取两次，每次0.5‑2小时，过滤，将两次的滤液合并混合得中药药液； （4）将全龟水提液、龟酶解液和中药药液三者混合，充分搅拌混匀后，过滤，浓缩， 加入麦芽糊精、白砂糖，用65%‑89%乙醇混合制粒，干燥，过筛，即得。 所述的全龟为活龟洗净宰杀后，去掉内脏后的部分。 [0011] 所述的步骤4中，制粒后的干燥过程为：置于50‑70℃下鼓风干燥箱干燥3‑8h。 [0012] 所述的步骤4中，过的筛的目数为20‑40目。 [0013] 所述的蛋白酶为木瓜蛋白酶、胰蛋白酶、中性蛋白酶、碱性蛋白酶、风味蛋白酶中 的一种或多种。 [0014] 本发明首次将生物法酶解技术加入到龟苓膏的制作中，与传统的单纯的水提工艺 相比，大大提高了龟的利用率，发明人前期实验多个方面数据显示，采用复合酶解技术后，龟肉的利 用率从21%提高至79%以上，并有进一步优化的空间。另外，还使产品增添了氨基酸、有机酸 及核苷酸等营养的东西，以及活性肽、牛磺酸、维生素等活性物质，增强产品功效。 [0015] 本发明将龟苓膏制作成龟苓膏固体颗粒，使产品淀粉等辅料的添加量大幅下降， 质量、体积显著变小，风味好，饮用方便，应用范围广。 [0016] 本发明去除了黑凉粉的制作工艺和煮膏、罐装等步骤，改为酶解工艺和固体颗粒 剂生产的基本工艺，避免需要添加较多的淀粉等辅料才能成型，即使高血糖、糖尿病患者也能服 用。 [0017] 本发明使得淀粉等辅料的添加量一下子就下降，质量、体积显著变小，风味好，饮用方 便，功能性稳定，有效扩大产品应用场景范围，具有很好的应用前景。 附图说明 [0018] 图1为各组经钙黄绿素染色后的斑马鱼脊椎骨荧光图像； 图2为斑马鱼骨骼染色荧光面积结果分析图； 图3为斑马鱼中性粒细胞显微成像图； 图4为斑马鱼中性粒细胞相对迁移数量统计图。 4 4 CN 113796481 A 说明书 3/7页 具体实施方式 [0019] 下面通过实施例进一步说明本发明。应该理解的是，本发明的实施例是用于说明 本发明而不是对本发明的限制。根据本发明的实质对本发明进行的简单改进都属于本发明 要求保护的范围。除非另有说明，本发明中的乙醇量的百分数是体积百分数。 [0020] 实施例1 取全龟200克、茯苓400克、甘草500克、栀子400克、槐花400克、罗汉果300克、金银 花200克、薄荷300克、凉粉草500克、麦芽糊精100克、白砂糖100克。 [0021] 所述的龟苓膏固体饮料，制备包括以下步骤： （1）取全龟，加入用龟重量的8倍水提取两次，每次2小时，过滤，将两次的滤液合并 得全龟水提液，将提取后的全龟龟渣收集备用； （2）取提取后的龟渣称重，然后粉碎制浆，其间不断加入水调节料液比位1:1，制得 龟浆； 用柠檬酸或食用碱溶液调节龟浆pH至5.5，加热至35℃，按照0.5万U/g龟渣的量加 入蛋白酶，恒温酶解3h，加热灭酶（100℃，10min），过滤，得龟酶解液； （3）取茯苓、甘草、栀子、槐花、罗汉果、金银花、薄荷、凉粉草，加入这些药材总重量 10倍的水提取两次，每次0.5小时，过滤，将两次的滤液合并混合得中药药液； （4）将全龟水提液、龟酶解液和中药药液三者混合，充分搅拌混匀后，过滤，浓缩， 加入麦芽糊精、白砂糖，用65%乙醇混合制粒，置于50℃下鼓风干燥箱干燥5h，过20目筛，即 得。 所述的蛋白酶为中性蛋白酶、碱性蛋白酶、风味蛋白酶的混合物。 [0022] 实施例2 取全龟1500克、茯苓1200克、甘草2000克、栀子600克、槐花800克、罗汉果1200克、 金银花1200克、薄荷1200克、凉粉草1500克、麦芽糊精6000克、白砂糖6000克。 [0023] 所述的全龟为活龟洗净宰杀后，去掉内脏后的部分。 [0024] 所述的龟苓膏固体饮料，制备包括以下步骤： （1）取全龟，加入用龟重量的11倍水提取两次，每次2.5小时，过滤，将两次的滤液 合并得全龟水提液，将提取后的全龟龟渣收集备用； （2）取提取后的龟渣称重，然后粉碎制浆，其间不断加入水调节料液比位1:  15，制 得龟浆； 用柠檬酸或食用碱溶液调节龟浆pH至5.0，加热至70℃，按照3万U/g龟渣的量加入 蛋白酶，恒温酶解4h，加热灭酶（100℃，10min），过滤，得龟酶解液； （3）取茯苓、甘草、栀子、槐花、罗汉果、金银花、薄荷、凉粉草，加入这些药材总重量 10倍的水提取两次，每次1小时，过滤，将两次的滤液合并混合得中药药液； （4）将全龟水提液、龟酶解液和中药药液三者混合，充分搅拌混匀后，过滤，浓缩， 加入麦芽糊精、白砂糖，用89%乙醇混合制粒，置于70℃下鼓风干燥箱干燥7h，过30目筛，即 得。 所述的蛋白酶为胰蛋白酶、中性蛋白酶、碱性蛋白酶、风味蛋白酶的混合物。 [0025] 实施例3 取全龟1000克、茯苓1000克、甘草1500克、栀子500克、槐花600克、罗汉果800克、金 5 5 CN 113796481 A 说明书 4/7页 银花1000克、薄荷1000克、凉粉草1000克、麦芽糊精2000克、白砂糖1500克。 [0026] 所述的全龟为活龟洗净宰杀后，去掉内脏后的部分。 [0027] 所述的龟苓膏固体饮料，制备包括以下步骤： （1）取全龟，加入用龟重量的9倍水提取两次，每次2小时，过滤，将两次的滤液合并 得全龟水提液，将提取后的全龟龟渣收集备用； （2）取提取后的龟渣称重，然后粉碎制浆，其间不断加入水调节料液比位1:5，制得 龟浆； 用柠檬酸或食用碱溶液调节龟浆pH至6.0，加热至58℃，按照0.8万U/g龟渣的量加 入蛋白酶，恒温酶解5h，加热灭酶（100℃，10min），过滤，得龟酶解液； （3）取茯苓、甘草、栀子、槐花、罗汉果、金银花、薄荷、凉粉草，加入这些药材总重量 8倍的水提取两次，每次1小时，过滤，将两次的滤液合并混合得中药药液； （4）将全龟水提液、龟酶解液和中药药液三者混合，充分搅拌混匀后，过滤，浓缩， 加入麦芽糊精、白砂糖，用75%乙醇混合制粒，置于60℃下鼓风干燥箱干燥6h，过25目筛，即 得。 所述的蛋白酶为风味蛋白酶。 [0028] 实施例4 取全龟2000克、茯苓1500克、甘草3000克、栀子800克、槐花1200克、罗汉果1500克、 金银花1500克、薄荷1500克、凉粉草2000克、麦芽糊精4000克、白砂糖2500克。 [0029] 所述的全龟为活龟洗净宰杀后，去掉内脏后的部分。 [0030] 所述的龟苓膏固体饮料，制备包括以下步骤： （1）取全龟，加入用龟重量的10倍水提取两次，每次1.5小时，过滤，将两次的滤液 合并得全龟水提液，将提取后的全龟龟渣收集备用； （2）取提取后的龟渣称重，然后粉碎制浆，其间不断加入水调节料液比位1:10，制 得龟浆； 用柠檬酸或食用碱溶液调节龟浆pH至7.0，加热至60℃，按照1万U/g龟渣的量加入 蛋白酶，恒温酶解3.5h，加热灭酶（100℃，10min），过滤，得龟酶解液； （3）取茯苓、甘草、栀子、槐花、罗汉果、金银花、薄荷、凉粉草，加入这些药材总重量 8‑12倍的水提取两次，每次1.5小时，过滤，将两次的滤液合并混合得中药药液； （4）将全龟水提液、龟酶解液和中药药液三者混合，充分搅拌混匀后，过滤，浓缩， 加入麦芽糊精、白砂糖，用70%乙醇混合制粒，置于55℃下鼓风干燥箱干燥7h，过28目筛，即 得。 所述的蛋白酶为木瓜蛋白酶。 [0031] 实施例5 取全龟4000克、茯苓3000克、甘草5000克、栀子1000克、槐花1500克、罗汉果2500 克、金银花3000克、薄荷3000克、凉粉草4000克、麦芽糊精6000克、白砂糖3000克。 [0032] 所述的全龟为活龟洗净宰杀后，去掉内脏后的部分。 [0033] 所述的龟苓膏固体饮料，制备包括以下步骤： （1）取全龟，加入用龟重量的12倍水提取两次，每次3小时，过滤，将两次的滤液合 并得全龟水提液，将提取后的全龟龟渣收集备用； 6 6 CN 113796481 A 说明书 5/7页 （2）取提取后的龟渣称重，然后粉碎制浆，其间不断加入水调节料液比位1:20，制 得龟浆； 用柠檬酸或食用碱溶液调节龟浆pH至7.5，加热至50℃，按照4万U/g龟渣的量加入 蛋白酶，恒温酶解6h，加热灭酶（100℃，10min），过滤，得龟酶解液； （3）取茯苓、甘草、栀子、槐花、罗汉果、金银花、薄荷、凉粉草，加入这些药材总重量 10倍的水提取两次，每次2小时，过滤，将两次的滤液合并混合得中药药液； （4）将全龟水提液、龟酶解液和中药药液三者混合，充分搅拌混匀后，过滤，浓缩， 加入麦芽糊精、白砂糖，用89%乙醇混合制粒，置于70℃下鼓风干燥箱干燥8h，过30目筛，即 得。 所述的蛋白酶为胰蛋白酶、中性蛋白酶、碱性蛋白酶、风味蛋白酶的混合物。 [0034] 实施例6 一、实验样品准备： 1、实验中对照组样品制备如下： 龟苓膏浸膏 注：龟苓膏浸膏处方和制法参照：国家中成药标准汇编眼科耳鼻喉科皮肤科分册， 国家药品监督管理局标准 龟苓膏  （WS‑11022(ZD‑1022)‑2002）。 [0035] 取龟（去内脏）10g、地黄67g、土茯苓133g、绵茵陈13g、金银花13g、甘草13g、火麻仁 13g。制法如下：   以上七味药材，将生地黄、土茯苓、火麻仁、甘草酌予碎断，冷水浸泡过夜。加水煎 煮三次，第一次3小时，第二次2小时，第三次1小时；金银花、绵茵陈加水熬煮二次，每次1小 时，合并滤液，滤过，滤液浓缩至约338ml龟加水熬煮6小时之后，成汁后，加入上述浓缩液 中，继续浓缩至密度为1.15±0.05即得龟苓膏浸膏。 [0036] 2、实施例1组 采用实施例1的原料配方和制备工艺，其中步骤4中浓缩完后的浸膏作为实验用样 品，不加麦芽糊精、白砂糖。 [0037] 具体制备过程如下： 取全龟200克、茯苓400克、甘草500克、栀子400克、槐花400克、罗汉果300克、金银 花200克、薄荷300克、凉粉草500克。 [0038] 所述的龟苓膏固体饮料，制备包括以下步骤： （1）取全龟，加入用龟重量的8倍水提取两次，每次2小时，过滤，将两次的滤液合并 得全龟水提液，将提取后的全龟龟渣收集备用； （2）取提取后的龟渣称重，然后粉碎制浆，其间不断加入水调节料液比位1:1，制得 龟浆； 用柠檬酸或食用碱溶液调节龟浆pH至5.5，加热至35℃，按照0.5万U/g龟渣的量加 入蛋白酶，恒温酶解3h，100℃下加热灭酶10min，过滤，得龟酶解液； （3）取茯苓、甘草、栀子、槐花、罗汉果、金银花、薄荷、凉粉草，加入这些药材总重量 8‑12倍的水提取两次，每次0.5小时，过滤，将两次的滤液合并混合得中药药液； （4）将全龟水提液、龟酶解液和中药药液三者混合，充分搅拌混匀后，过滤，浓缩即 得。 7 7 CN 113796481 A 说明书 6/7页 所述的蛋白酶为中性蛋白酶、碱性蛋白酶、风味蛋白酶的混合物。 [0039] 二、预防骨质疏松（滋阴）功效评价实验 1、实验方法 选取健康的4dpf的斑马鱼80尾随机分为空白组及模型组，空白组20尾，模型组60 尾。从4dpf开始，空白组加入含0.5% DMSO的培养基，模型组加入含10μmol/L  （Dex）培养基（含0.5% DMSO），28.5±0.5℃恒温培养48h后，将模型组斑马鱼随机分为Dex组 （模型组），对照组，实施例1组，每组20尾。 [0040] 空白组及模型组给药条件不变，对照组加入龟苓膏溶液，将对照组的龟苓膏浸膏 用含10μmol/L Dex的养鱼水稀释，其最终中药材含量为60mg/L。 [0041] 实施例1组加入龟苓膏固体颗粒溶液1（将实施例1的龟苓膏固体颗粒用含10μmol/ L Dex的养鱼水稀释，其最终中药材含量为60mg/L），所有组别均含0.5% DMSO，继续于28.5 ±0.5℃恒温培养，隔天换药，孵育至9dpf。 [0042] 用0.2%钙黄绿素溶液对各组斑马鱼进行染色，5min后吸出钙黄绿素溶液，用养鱼 用水清洗，每次15min，重复清洗3次。每组随机选取10尾形态正常斑马鱼，用0.04g/L的三卡 因对斑马鱼进行麻醉，在荧光显微镜下拍照并统计各组斑马鱼椎骨荧光面积。 [0043] 2、实验结果 通过结合imageJ图像分析软件和GraphPad Prism8对斑马鱼骨骼染色结果进行数 据处理。使用Excel进行数据统计，斑马鱼骨骼染色结果统计汇总结果如图1和图2所示。 [0044] 图1显示，与空白组相比，模型组斑马鱼椎骨节数减少，椎骨面积减少；与模型组相 比，对照组和实施例1组可以明显地增加斑马鱼椎骨节数与面积，促进骨骼形成。 [0045] 结合图2数据分析，与空白组比较，模型组斑马鱼椎骨荧光面积显著减少（P＜ 0.01），与模型组组比较，对照组和实施例1组椎骨荧光面积显著增加（P＜0.05），且与对照 组比较，实施例1组椎骨荧光面积更大。 [0046] 结论 该结果为龟苓膏固体颗粒对斑马鱼表现出明显的骨质疏松抵抗效果，其效果优 于传统工艺制作的龟苓膏，具有促进斑马鱼骨骼形成、保护骨骼的作用。 [0047] 三、清热解毒（抗炎）功效评价实验 1.实验方法 选取健康的3dpf的中性粒细胞转基因型斑马鱼80尾随机分为空白组及模型组，空 白组、模型组、对照组、实施例1组，各20尾。空白组加入养鱼水；模型组加入含20μmol/L 硫 酸铜的养鱼水；对照组加入龟苓膏溶液2（将对照组的龟苓膏浸膏用含20μmol/L硫酸铜的养 鱼水稀释，其最终中药材含量为60mg/L）；实施例1组加入龟苓膏固体颗粒溶液2（将实施例1 的龟苓膏固体颗粒用含20μmol/L硫酸铜的养鱼水稀释，其最终中药材含量为60 mg/L）,所 有组别均含0.1% DMSO，于控温光照培养箱中28.5±0.5  ℃恒温培养2 h。在体视荧光显微 镜下实时活体观察中性粒细胞在硫酸铜造成的急性炎症的反应，并拍照。 [0048] 2.实验结果 由图3、图4可知，炎症模型组斑马鱼的中性粒细胞迁移数明显高于空白对照组（P ＜0.01），硫酸铜诱导的炎症模型构建成功。与炎症模型组相比，实施例1组的中性粒细胞迁 移数量显著减少（P＜0.05），这说明龟苓膏固体颗粒具有非常明显的抗炎作用，且作用效果优于 8 8 CN 113796481 A 说明书 7/7页 对照组。 [0049] 3、结论 该结果为对照组龟苓膏与实施例1组龟苓膏固体颗粒在斑马鱼上，二者对斑马 鱼均表现出一定的抗炎效果，具有清热解毒作用，且实施例1组效果更优。 [0050] 虽然，上文中已经用一般性说明、具体实施方式及试验，对本发明作了详尽的描 述，但在本发明基础上，可以对之作一些修改或改进，这对本领域技术人员而言是显而易见 的。因此，在不偏离本发明精神的基础上所做的这些修改或改进，均属于本发明要求保护的 范围。 9 9 CN 113796481 A 说明书附图 1/4页 图1 10 10 CN 113796481 A 说明书附图 2/4页 图2 11 11 CN 113796481 A 说明书附图 3/4页 图3 12 12 CN 113796481 A 说明书附图 4/4页 图4 13 13

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